Numunelerin orijinal ambalajı açılmadan önce ve son kullanıcı tarafından kullanımı süresince mikrobiyolojik olarak stabil kalması için kullanılan koruyucuların etkinliğinin test edilmesi gerekmektedir.
Koruyucu etkinliğinin incelendiği bu test ile (Antimicrobial effectiveness test) numunenin orijinal ambalajının açılmasından sonra tavsiye edilen son kullanma tarihine kadar ürün içerisinde kullanılmış olan koruyucular ile ürünün korunup korunmadığı tespit edilir.
Herhangi başka bir standart bildirilmedi ise USP43 NF38 <51> ve EP 9.8 <5.1.3> standartlarına göre Koruyucu Etkinlik Testi, numuneler üzerinde laboratuvar koşullarında oluşturulan yapay bir kontaminasyon ve bu kontaminasyona ait alınan sayısal verilere dayandırılmaktadır.
Testin sonucu, yapay olarak kontamine edilen numunenin türüne göre talep edilen zaman aralıklarında (0.saat,6.saat, 24.saat,2.gün, 7.gün, 14.gün ve 28. gün gibi) içeriğindeki mikroorganizma sayılarının logaritmik olarak değerlendirilmesi ile tespit edilmektedir.
Numuneye; Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Candida albicans ve Aspergillus brasiliensis (Aspergillus niger) mikroorganizmaları ile referans metotlara uygun sayıda mikroorganizma laboratuvar koşullarında inoküle edilerek süreç başlatılır.
- Pseudomonas aeruginosa ATCC®9027
- Staphylococcus aureus ATCC®6538
- Escherichia coli ATCC®8739
- Candida albicans ATCC®10231
- Aspergillus brasiliensis (A. niger) ATCC®16404